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人體細胞
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細胞名稱 |
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傳代方法 |
貨號 |
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UT-7 人急性成巨核細胞白血病細胞 |
DMEM+10% FBS +1%雙抗 |
維持細胞濃度在1.0~1.5×106 cells/ml，1：2傳代，2~3天1次。 |
C1171 |
詳細介紹：
細胞名稱 人類原巨核細胞型白血病細胞；UT-7
形態(tài)特性 圓形
生長特性 懸浮生長，有1%~2%的細胞可輕微貼壁。
特征特性 該細胞于1988年建系；源于一名64歲患有急性粒細胞白血病（AML M7）的男性的骨髓；對多種細胞因子有反應。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS；5-7u/ml Epo
傳代方法 維持細胞濃度在1.0~1.5×106 cells/ml，1：2傳代，2~3天1次。
傳代情況 C7
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
相關資料：
支原體檢測 培養(yǎng)法（-）
STR
Amelogenin：X，Y；CSF1PO：12；D13S317：8；D16S539：10，12；D18S51：14，17；D19S433：14，14.2；D21S11：31.2；D2S1338：18，23；D3S1358：16；D5S818：12；D7S820：8；D8S1179：11，15；FGA：23；TH01：6，9；TPOX：10；vWA：14，18，19；
同工酶
染色體
使用權限 A類
細胞服務內容:
1、協(xié)助引進科研急需 的細胞株/系。
2、提供細胞保藏服務。
3、提供細胞供應服務。
4、提供細胞篩選或建立特殊細胞株/系的服務。
5、 提供與細胞培養(yǎng)配套的部分試劑
6、 提供支原體等各項檢測的技術服務
細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1） 準備培養(yǎng)基；北美胎牛血清，10%；雙抗1%。
2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。 對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法： 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
1. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
2. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
3. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。 下面T25瓶為例；
1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細胞變圓脫落后，加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
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